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          恒遠問您:轉化大腸桿菌實驗的目的是哪三個方面呢?

          點擊次數(shù):13318   發(fā)布時間:2014/2/17 11:05:21

               隨著一場雨又迎來了一個新的工作日,可能剛起床那會還是睡眼惺忪,但是上班的時候可就要進入工作狀態(tài)啦!相信當聰明的您在看到本文章的標題時就能夠知道,我們今天要為您談說的是關于轉化大腸桿菌的實驗。

              恒遠問您:轉化大腸桿菌實驗的目的是哪三個方面呢?當然,這可不止簡單的一個問題,既然我們問出了,那么就有答案啦。如果您現(xiàn)在移動右手中的鼠標去搜索轉化大腸桿菌實驗的話一定會出現(xiàn)很多的相關資料,有朋友在購買我公司的產(chǎn)品后提出了需要技術指導,那么我們今天就來仔細的看看本實驗,*終來解答實驗的目的是哪三個方面。
              我們?yōu)槟淼倪@套實驗過程簡單明了,只需要十個步驟就可以完成。
              1、事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃。
              2、從-70℃ 超低溫冰柜中取出一管(100 μl)感受態(tài)菌,立即用手指加溫融化后插入冰上,冰浴5~10 min。
              3、加入5 μl 連接好的質(zhì)粒混合液(DNA含量不超過100 ng),輕輕震蕩后放置冰上20 min。
              4、輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2 min進行熱休克,然后迅速放回冰中,靜置3~5 min。
              5、在超凈工作臺中向上述各管中分別加入500 μl LB培養(yǎng)基(不含抗菌素)輕輕混勻,然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1 h。
              6、在超凈工作臺中取上述轉化混合液100-300 μl,分別滴到含合適抗菌素的固體LB平板培養(yǎng)皿中,用酒精燈燒過的玻璃涂布棒涂布均勻。
              7、如果載體和宿主菌適合藍白斑篩選的話,滴完菌液后再在平板上滴加40 μl 2% X-gal,8 μl 20% IPTG,用酒精燈燒過的玻璃涂布棒涂布均勻。
              8、在涂好的培養(yǎng)皿上做上標記,先放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中30~60 min 直到表面的液體都滲透到培養(yǎng)基里后,再倒置過來放入37℃恒溫培養(yǎng)箱過夜。 
              9、在被細菌污染的桌面上噴灑70%乙醇,擦干桌面,寫實驗報告。
              10、觀察平板上長出的菌落克隆,以菌落之間能互相分開為好。注意白色菌斑。
              上海恒遠感謝您使用來時間觀看了本篇文章,如果您有什么產(chǎn)品需要以及技術問題解惑都是可以來電給我公司詢問的。旁余之話我們不多說,這里給出了一個小提醒,在操作時,玻璃涂布棒上的酒精熄滅后稍等片刻,待其冷卻后再涂。實驗過程中也要細心哦!
              已經(jīng)快要是文章的結尾了,您還記得我們給出的問題嗎?在問題中已經(jīng)表明實驗目的為三個方面,我們*后就來看看究竟是哪三個方面。
              1、用于分子生物學其他研究。
              2、將重組DNA分子導入大腸桿菌受體細胞進行復制,增殖和表達,以獲得目的基因。
              3、驗證大腸桿菌感受態(tài)細胞效果。

          原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司

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